产品货号:
KD2269
中文名称:
0.1M亚精胺溶液(过滤除菌,基因枪转化)
英文名称:
0.1M Spermidine Solution
产品规格:
50mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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0.1M亚精胺溶液(过滤除菌),为客户下单之后新鲜配置的无菌溶液。氯化钙溶液(2.5mol/L,无菌),为经过过滤之后高压灭菌的无菌溶液。 一般此浓度的亚精胺和氯化钙用于基因枪转化法转基因实验, 亦可用于其他实验的高浓度储备液。
组分 | 规格 |
0.1M亚精胺溶液(过滤除菌,基因枪转化) | 50mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期1年。
操作步骤:
- 在进行实验前,至少培养样品30天,这样确能保叶片大于5×6cm2。
- 根据以下步骤制备DNA-金粉混合液:
- 将金粉微粒中加入充足的无菌蒸馏水。
- 使用100%乙醇对金粉微粒进行三次洗涤并弃去浮层。
- 加蒸馏水使金粉微粒重新悬浮。
- 将准备好的DNA溶液(1μg/μL)添加到金粉微粒溶液中,形成浓度为1μg DNA/0.6mg金粉微粒悬浊液。
- 剧烈摇晃微离心管使得样品混合均匀。
- 滴入适当体积的0.1M亚精胺和2.5M CaCl2进入试管,同时不断剧烈地摇晃。
- 继续摇晃一分钟以上。
- 用100% EtOH进行三次洗涤,并弃去浮层。
- 重新使DNA包裹的金粒子悬浮于100%的EtOH中。
- 将金粉微粒中加入充足的无菌蒸馏水。
- 按照说明书中要求的,讲UTS-10安装到GDS-80系统上,并设置40~50psi的传递压力。
- 调整距离量尺至6~8cm的传递距离。
- 把四爪叶片夹夹到目标叶上,用手调螺栓将其拧紧固定。
- 将等分10μL DNA混匀悬浊液倒入样品装载孔中。
- 对叶片标本进行轰击。
- 培育植株三天以上,通过使用CRi Maestro的体内成像系统观察荧光结果。
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